Optimización de un protocolo para el cultivo “in vitro” de sangre periférica en la mojarra paleta Vieja melanura

Abstract

Antecedentes: En las mojarras nativas del sureste mexicano, son pocos los estudios encaminados a comprender la dinámica del tejido sanguíneo. La mojarra paleta *V. melanura*, es un cíclido que ha sido utilizada como modelo para estudios de biología pesquera, enriqueciendo la información sobre su potencial para la acuicultura; abarcando aspectos biológicos, taxonómicos, hábitos alimenticios, genética y en los últimos años en hematología. En años recientes, el tejido hematopoyético en peces se ha centrado en el cultivo “in vitro” ante el poco conocimiento de las funciones inmunológicas de los leucocitos, siendo este un procedimiento sencillo que evita el sacrificio de los especímenes, dando pauta a las leyes y normas que regulan el uso de animales en experimentación. Por lo anterior, este trabajo plantea optimizar una técnica para el cultivo “in vitro” de sangre periférica de *V. melanura*, favoreciendo estudios de biología celular, citogenética e inmunología.

Metodología: Las mojarras fueron obtenidas del sistema de acuicultura perteneciente a la Universidad Juárez Autónoma de Tabasco, División Académica de Ciencias Biológicas (UJAT-DACBiol). Se realizaron un total de 15 cultivos de sangre periférica mediante dos métodos: cultivo estándar y cultivo con Ficoll-Paque™ PLUS. Los cultivos fueron incubados durante cinco días a 24 ± 0.1 °C. Para el sembrado se utilizó colchicina en citrato de sodio al 0.1%, citrato de sodio al 1% y fijador (ácido acético y alcohol metílico) en proporción 3:1.

Resultados: La descripción citológica se efectuó mediante un microscopio AxioScope A1 a 40x. Además, se realizó un conteo de células rojas (eritrocitos) y células blancas (leucocitos). Los datos generados se calcularon con las herramientas del programa Microsoft Excel 2016©. Los eritrocitos fueron las células sanguíneas más abundantes, pero con el uso del Ficoll-Paque™ se obtuvieron diferencias significativas con alto porcentaje de células leucocitarias.

Conclusiones: El protocolo desarrollado para el cultivo de sangre periférica es eficaz en cultivo estándar y cultivo con Ficoll; siendo una técnica sencilla y económica que no requiere equipos e instalaciones de alta complejidad y que mantiene a los especímenes vivos.