Inducción de la diferenciación eritroide de células K562 por tratamiento con ribavirina

Abstract

Las leucemias mieloides y las talasemias representan un importante problema de salud debido a que estas patologías se caracterizan por que afectan directamente la diferenciación terminal de los eritrocitos, desencadenando en sintomatologías como fatiga, anemias, dificultad para respirar, hematomas, palidez, pérdida de peso o sangrado, y en sus casos más graves la muerte. Se ha reportado que el uso de altas concentraciones del fármaco antiviral ribavirina (>50 µM) induce la diferenciación terminal de células mieloides inmaduras a eritrocitos e incrementa la hemoglobina fetal, sin embargo, se desconoce el mecanismo de acción vinculado con este efecto. En este contexto, se propuso como objetivo evaluar la participación de las vías MAPK y AKT, así como de la actividad de la proteína eIF4E (4E), sobre la diferenciación eritroide de las células K562 inducida por el tratamiento con ribavirina. Para ello, se empleó ribavirina (≤50 µM) en un modelo con células eritroleucemicas K562, a las cuales se les realizó la caracterización cualitativa y semicuantitativamente de células diferenciadas con ribavirina mediante tinción con bencidina, microscopia óptica y espectrofotometría. Se estimó la viabilidad celular a través del ensayo XTT. Se identificaron las fases del ciclo celular por tinción con yoduro de propidio y citometría de flujo. Por último, se analizó la expresión de marcadores y rutas de diferenciación por RT-PCR y western blot. De acuerdo con los resultados, ribavirina demostró ser inductor de la diferenciación eritroide (máx. 98%) y promotor de la síntesis de hemoglobina fetal en concentraciones menores a 50 µM a través del aumento de la expresión de genes y proteínas como HB-B, HBG, KLF1, TAL1, GATA-1; también redujo la expresión de factores que inhiben la maduración eritroide como GATA-2 y FAM122. Además, se registró una regulación a la baja de la fosforilación de las proteínas de la vía MAPK / AKT como también de 4E. Finalmente podemos concluir que la concentración de 30 µM de ribavirina es la óptima para promover la diferenciación eritroide, la síntesis de hemoglobina, la disminución de la viabilidad celular y la reducción de la proliferación. La disminución de la fosforilación de 4E sugiere una posible regulación de la traducción de los factores que regulan de manera negativa a la diferenciación eritroide (GATA-2, FAM122).