Análisis molecular de un polipéptido de la proteína RmS-17 para el desarrollo de un antígeno vacunal contra garrapatas Rhipicephalus microplus en México

Abstract

El objetivo del trabajo fue analizar un polipéptido derivado de la proteína RmS-17 en cepas y aislados de garrapatas Rhipicephalus microplus de México. Se realizó un análisis in silico de la secuencia de aminoácidos con el fin de seleccionar una región que constó de 145 aminoácidos. Posteriormente, se diseñó un par de oligonucleótidos específicos para lograr la amplificación del fragmento de interés en cada una de las cepas y aislados de garrapatas en estudio, obteniendo un amplicón de 435 bp. Los productos obtenidos fueron clonados en el vector comercial pCR®4-TOPO® y los plásmidos transformados en células competente de E. coli TOPO10® . Se seleccionaron clonas positivas con fines de secuenciación. Los resultados mostraron un 99.08% de identidad para la cepa de referencia “Media Joya” con respecto a la cepa previamente reportada en Brasil (KC990116.1). En relación a las secuencias de las cepas “Vargas”, “Híbrido”, “Huastecas” y de los aislados de Campeche, Chiapas, Hidalgo, Morelos y Guerrero se observó un 100% de identidad y similitud. Estos resultados demuestran un elevado grado de conservación en la secuencia que codifica para el polipéptido RmS-17 y sugiere ser una propuesta para llevar a cabo el desarrollo de un antígeno vacunal que coadyuve en el control de infestaciones por garrapatas R. microplus en distintas zonas geográficas de México.